宜昌市麦芽糖醇
早期，人们观察到丨，2 -亚乙基甘醇和甘油之类的无环多元醉具有甜味。 这些简单的分子中包含与糖一致的结构特点，人们因此就很自然地推想到糖的甜 度与分子内的羟基总数目有关。然而人们很快就认识到，含有相同羟基数目的葡 萄糖和半乳糖所具备的甜度相差甚大，而含有5个羟基的木糖醇却比含有6个羟 基的山梨糖醉要甜得多。很显然，这种根据羟基数目推测糖分子甜度的假说是错 误的。
应用在食品上的糖精混合物大多使用糖精钠。最近的研究表明，糖精钙的甜 味特性优于糖精钠，其苦后味不明显，当与其他甜味剂混合使用时，它能提供更 好的甜味刺激。
曾尝试在大肠杆菌中表达重组奇异果素。在表达载体中插人以化学法合成的 奇异果素基因，所得的载体即转化成大肠杆菌菌株HB101。尽管通过SDS - PAGE和Western印迹分析可检测到重组奇异果素的存在，但是，所得的通组奇 异果素并不具味道修饰作用。在酵母和转基因烟草中的尝试结果也一样，尽管都 成功地表达出了重组奇异果素，但是产物也不具备甜味诱导活性。
高效甜味剂的优点，集中体现在：①化学性质稳定，耐热、酸和碱，不易出现分解失效现象，故使用范围比 较广泛。②不参与机体代谢。多数高效甜味剂经口摄入后原原本本地排出体外，不 提供能量，适合糖浓病人、肥胖症人和老年人等特殊营养消费群使用。③甜度较高，-?般都在蔗糖甜度的50倍以上。④价格便宜，等甜度条件下的价格均低于蔗糖。⑤不是U腔微生物的合适作用底物，不会引起牙府龋变。
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
表4 -24 M. vinacea的a -半乳糖苷酶催化甜叶悬钩子苷
用酶-化学联合方法制备纽甜可以进一步通过固定化酶技术将脂肪酶或酯酶 固定在硅胶、次乙酰塑料（Celite)、DEAE-Sephadex、CM - Sephadex等类似的 固定相上。酶的固定化，不仅可以方便地实现酶的循环利用，还可以很容易地分 离酶和产品，使酶-化学法生产纽甜有着更大的优势。
甜蜜素风味良好，不带异味，还能掩盖诸如糖精类人工甜味剂所带有的片涩 味，因此，它大多是与糖精一起混合使用的。例如，5mg糖梢和50mg甜蜜素混 合制成的餐桌甜味剂，其甜度与单独使用125mg甜蜜素或12.5mg糖精相等。虽 然两者间的混合比例随产品的种类不同而有很大变化，最常用的配比是10份甜 蜜素加1份糖楮:，这样两种甜味剂的甜度相等，混合使用会使产品口感变好，这 可能是由于两者相互之间能够互相掩盖对方的不良风味。
世界上大多数制造商还是使用Fahlberg和Rernsen早期的合成途径生产糖精 的。如图6-10所示这种方法首先使甲苯与氣磺酸反应生成邻和对甲基磺酰氣， 之后与氨作用生成相应的甲苯磺酰胺。在磺酰氣溶剂中分离出邻-甲苯磺酰胺， 经氧化生成邻-氨磺酰苯甲酸，再经加热环化即为糖楮。