乐陵市糖精钠
CGTase催化转糖苷反应中，葡糖基是很好的糖基受体，而半乳糖基则不是。 因此用半乳糖苷酶催化转糖苷反应，将半乳糖基连接至甜叶悬钩子苷的19-竣 基相连的葡糖基上，再用该产物作为CGTase催化的底物，这样就可以选择性地 在13 -0H相连的葡糖基上进行转糖苷反应。
由上看出，以三苯基膦-CC14进行氣化得率偏低，需加低级醇（如甲醉） 来终止反应，并去除剩余三苯基膦和氣化三苯基膦，操作步骤较Vil8meier试剂 多，且三苯基膦价钱较贵，相比之下ViUmeiei■试剂略胜一筹。
(三} 4, 1、6'-三氣-6-乙酰基蔗糖酯（TGS-6-a)的分离
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
早在1895年，就有文献记载了西部非洲防己科Men—maceae植物Di-